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新聞與視野

卡文斯免疫缺陷小鼠助力100株腫瘤細(xì)胞成瘤性驗(yàn)證:NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞篇

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01實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp; 

驗(yàn)證NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞成瘤性。

02實(shí)驗(yàn)材料  

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

1.png

細(xì)胞、試劑

1.jpg

儀器設(shè)備、耗材

1.jpg

03實(shí)驗(yàn)步驟  

細(xì)胞準(zhǔn)備

1)取處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,細(xì)胞達(dá)80-90%左右密度為宜。收集細(xì)胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基。

2)胰酶消化細(xì)胞后用預(yù)冷的PBS洗兩遍,去除細(xì)胞中的血清。

3)用PBS或者無血清培養(yǎng)基吹打細(xì)胞沉淀至濃度4.7×10^7個(gè)細(xì)胞/ml,小鼠接種腫瘤細(xì)胞數(shù)量為2.35×10^6細(xì)胞/位點(diǎn),吸取50ul細(xì)胞懸液與50ul基質(zhì)膠。

4)細(xì)胞消化后30min內(nèi)接種到小鼠皮下。

5)接種前用槍將細(xì)胞懸液充分的吹散,防止細(xì)胞成團(tuán)而降低細(xì)胞成活率。

小鼠注射接種

接種點(diǎn)選擇小鼠兩側(cè)肩胛部,碘伏消毒皮膚后將混有基質(zhì)膠的細(xì)胞懸液注射至目標(biāo)部位;注射完畢后,緩慢退出針頭,無菌棉簽按壓穿刺點(diǎn)1min;每周2次測(cè)量小鼠腫瘤體積。

04腫瘤生長情況

成瘤率

BALB/c Nude(6/6)=100%; 

NOD-SCID(4/4)=100%;

整體成瘤率(10/10)=100%。

(注:數(shù)字4、6、10指接種位點(diǎn))。

生長曲線

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STR鑒定情況

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小鼠成瘤圖

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05結(jié)論     

NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞可在BALB/c Nude及NOD-SCID小鼠上成瘤,本次實(shí)驗(yàn)成瘤率為100%。




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